【应用多聚□链反应诊断小儿结构性脑膜炎的研究】马青山.pdf

目录 基本原理 材料和方法 结 果 讨 论 结 致 参考文献 英文摘要
前言 结核杆菌是结核病的病原体,具有较强的传染性,传播广、致病力强,可引起肺结核及肺外结核病。在肺外结核病中,结核 性脑膜炎(结脑)是最严重的病型,并发症多、后遗症严重,尤 其对于小儿,有很高的病死率和致残率。结核性脑膜炎若早期诊 断、及时彻底治疗可痊愈(3口)。典型的结核性脑膜炎临床诊 断并不困难,但在结脑的早期或不典型病例诊断仍有一定困难,有时很难与化脓性脑膜炎(化脑)及病毒性脑炎(病脑)鉴别,往往延误诊断,推迟治疗时机。故结脑的早期、快速诊断具有重 要意义.实验室结核杆菌传统的检查方法包括直按涂片显微镜检查、细菌培养及某些免疫技术。
基本原理 聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)又称 基因体外扩增技术,用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。(如图!所示)人工合成两段序列互不相同的宴核苷酸引物,置 待扩增的DNA于高温下解链变为单链模板.在低温条件下引物分 别与目的片段两侧的两条链互补结合.然后退火引物在DNA聚合 酶作用下将单核苷酸从引物3端开始掺入,沿模板5一3 方向延 伸,合成DNA新股。如此反复进行变性、退火、延伸这一循环.由于每一周期所产生的DNA均能成为下一次循环的模板,所以 PCR产物以指数方式增加,经过25-30次周期之后,特异DNA扩 增达百万倍。 