【人胎胰组织块冷冻保存後高压氧培养的实验研究】金昌男.pdf
4 -4 -5 -5 -5 -5 -5 -5 -6 -6 6 -6 7 -7 -7 -7 -8 8 录(六)复温后的高压氧培养过程中不同时间培养液 目 一,主要实验仪器和试剂(一)人血清制备(二)胰岛组织制备 1,培养液的配制 2,胎胰组织来源-3,冷冻前的组织培养(三)冷冻降温过程(四)复温过程(五)复温后的高压氧培养 1,含酶培养液的配制 2,高压氧培养 岛素含量测定-胰岛B细胞胰岛素释放试验 胰岛素放射免疫测定 组织学检查-(十)对照组实验方法 摘要— 引言一 材料与方法 二,实验方法(七)(八)(九)
要 为了提高移植用胎膜的质量,我们对冷 冻一复苏后的胎胰组织块进行了高压氧培 养,观察了高压氧培养对冷冻一复苏后的 将中期妊娠水鑫引产胎儿的胰腺,机 械剪碎成0-1mm大小的组织块,在 95 空气、5 二氧化碳、37C恒温湿化环 境中培养三天后,采用两步降温法将胎胰 组织块冷冻保存在-196C液氮中,保存30 一40天后进行快速复温,复温后又在95 氧、5 二氧化碳、37℃恒温湿化环境中 进行组织培葬。为了防止高压氧状态下产 生的氧自由基对胎胰组织的损伤,培荠液 内加入氧自由基清除酶:超葬歧化酶和过 氧化氢酶。
10、超净工作台:江苏省无锡医疗器 11、液氮罐:河南新乡冷冻设备厂 正常分娩胎儿婉出、切断脐带后,无菌条件下采胎盘脐带血,放于室温(22 C)下1小时、4C条件下10小时,使血液 凝固后充分收缩,离心沉淀(3000转/分 15分钟,取上清液分装于30毫升小瓶内 然后再置于56C水浴中加热30分钟灭活 补体,冷却后冷藏于一30C冰箱内备用 将RPMI1640培养粉1袋(10克)HEP ES4760毫克、谷氨酰胺292毫克倒入1500 毫升容器里,加入三蒸水1000毫升,充 分溶解,加入碳酸氢钠1克,用1N NaoH和1NHcL调节PH6.