【羊垂体催乳素的分离纯化及鉴定和单克隆抗体的制备性质研究及应用】周柏光.pdf
目录 内容摘要与关键词 前言 主要实验材料 实验方法与结果 一、羊垂体催乳素(PRL)的分离、纯化及鉴定*1实验方法 2实验结果 3实验讨论.二.5株抗。PBL单克隆抗体的制备:1免疫动物骨髓瘤细胞的培养 3细胞融食及杂交瘤细胞的选择性培养 4ELISA法检测抗OPBL抗体.1 3 5克隆化扩大培养 7、冻存细胞 15 8、制备单克隆抗体的腹水 9抗。
摘要 从新鲜羊垂体中用硫酸铵沉淀和Q.A E 一S e ph dex-A25 目离子交换层析的方法:得到了纯度较高的羊垂体催乳素(OP 3L)以8D8一聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定为一条带,以鸽味数试验鉴定了具有较好的生物活性应用杂交瘤技术建立 五株分泌抗OPBL的单克隆抗体的杂交瘤细胞株从小鼠腹 水获得单克隆抗体并用羟基磷灰石吸附层析的方法进行纯化.对得到的单克隆抗体购性质进行研究免疫双扩散实验测定了五 株单克隆抗体的类及亚类,结果有一株为I8G1,其余四株为 IG2用EL1 BA方法测定了五株单克隆抗体的特异性 和亲和力用竞争性固相抗体结會试验测定了五株单克隆抗体的
种技术并且很快得到了广泛的应用目前这种应用正日益深入 到备个领域制备出抗oPHL的单克隆抗体、国内尚未见报道 国外也是在近年才有关于抗。PRL单克隆抗体的报道.制备出抗PB工的单克隆抗体具有相当广泛的应用首先对研 研B工本身的结构与功能方面有相当大的意义如能用抗 PBL单克隆抗体标法出PBL的某些功能部位,则可进一‘步分离出这种功能片段而用采代替人催乳素的某些功能这种单 克隆抗体还被期望能做为人的催乳素分子表面不同亚区的表面标 提取PBL的BNA而后逆转录用于DNA重组而生产OP BL这样在许多方面都有着重大的意义(11］另外如能获 得足够数量的PB工在畜牧业