【人类急性髓系白血病相关逆转录病毒基因表达的研究】.pdf

目一、中文摘要二、英文摘要三、正文前言 13 材料和方法结果结论

方法 1.研究对象:选择初发的急性髓系白血病患者19例,男性8例,女性11例,年龄17-63岁,中位年龄34岁,所有病例均按FAB分型标准诊断,对照组20例,男性10例,女性10例,年龄22-64岁,中位年龄39 岁,标本为外周血10ml或骨髓液2ml.2.方法:白血病细胞或单个核细胞分离和RNA提取:用Ficoll-Hypague.密度梯度分离出白血病细胞和单个核细胞,再采用TRIZOL试剂盒提取RNA,所提取的RNA溶于经DEPC处理的去离子水中,取2ulRNA在260nm和280nm下测定其光密度(OD)值,其余保存在-70C。

3.RT-PCR: PCR扩增结束后,取10ulPCR产物在1 琼脂糖凝胶上电泳,设计的引物扩增片段长度为790bp,同时选择大多数细胞均表达的β- actin作内对照,扩增片段为320bp,结果示:14例急性髓系白血病组11例扩增出阳性条带,阳性率为78 ,而对照组均为阴性.讨论急性白血病是造血系统最常见的恶性肿瘤,其病因和发病机理迄今尚未明确,一些哺乳类动物白血病早已证实是由逆转录病毒感染引起。成人T淋巴细胞白血病(ATL)和毛细胞白血病(HCL)也已被证实由逆转录病毒即成人T淋巴细胞白血病病毒I/II(HTLV-I/II)感染所致,大颗粒淋巴细胞白血病(LGL)