【环境雌激素体外筛检方法-E-screen法的建立和应用】.pdf

目录一、中文摘要二、英文摘要三、正文 1.前言 2．材料与方法 3.结果 4.讨论 5.结论 6．参考文献四、综述五、致谢

2材料与方法 2细胞株和培养条件雌激素敏感、雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7BUS细胞株,以含5 胎牛血清的DMEM培养液培养传代。培养条件:37℃、6 C02/93 空气、相对湿度95 ±5 .2人血清中雌激素的去除健康成年男性血清经56℃水浴热灭活后备用。经酸洗的活性碳在临用前用蒸馏水洗两次,制备5 碳-0 葡聚糖T悬液。取与血清等体积的碳葡聚糖悬液,经600rpm离心5min后去除上清液,加入血清与碳葡聚糖颗粒混匀。将此血清-碳葡聚糖混合液置37℃下1小时,并以6转/min摇动以保持混悬状态,使血清与碳充分接触。

初筛,它具有敏感、快速、简便、可靠等优点.4E-SCREEN试验有一定的局限性,如缺乏代谢活化系统,无法筛检雌激素样物质前体:观察不到外来化学物与体内激素结合蛋白及体内其它物质的相互作用.4E-SCREEN试验受细胞亚株、培养条件等因素的影响,有必要对这些影响因素作出规范,以便在不同的实验室间进行比较.4本试验发现DES为雌激素受体的全激动剂:硫丹为雌激素受体的部分激动剂:4-羟化他莫昔酚在本试验条件下无雌激素活性。