【单细胞氧化DNA链断裂和修复动力学及化学干预的研究】.pdf

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单细胞氧化DNA链断裂和修复动力学及化学干预 的研究 StudyonOxidativeDNAStrandBreakageandRepair Kinetics and Chemical Intervention attheLevel of SingleCell 浙江大学医学院病理生理学 97级硕士研究生李明正 PostgraduateforM.A.inPathophysiology Li MingZheng 导师 金中初 Supervisor Jin ZhongChu 浙江大学 ZheJiangUniversity 2000.单细胞氧化DNA链断裂和修复动力学及化学干预 的研究 浙江大学医学院病理生理学 97级硕士研究生李明正 导师金中初 摘要 活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)可诱发DNA损伤,它所引起 的遗传信息改变与衰老及许多年龄相关性疾病(如肿瘤、心血管疾病等)关系密切,因而成为研究退行性疾病和化学致癌的一个热点。DNA链断 裂(包括SSB、DSB)和碱性易损位点的形成是氧化DNA损伤的主要类 型。近年来一项新的单细胞凝胶电泳技术(SCGE),也称彗星试验(comet assay)出现,由于其能在单细胞水平上反应DNA链断裂和应用上的优点 而被引I入化学物质致DNA损伤研究,但对清除剂DMSO抑制,提示酪醇有通过清除OH达到抗氧化的可能.综上所述,采用SCGE进行DNA损伤研究时,事先应进行实验 因素的探索以适应不同细胞敏感性的差异,从而保持较低的DNA迁移距 离背景值,本实验建立了适用于CHL细胞和HeLa细胞的实验条件.SCGE能灵敏地定量检测不同氧化剂所致DNA链断裂,是研究DNA氧 化损伤极为有效的工具。不同氧化剂所致DNA损伤的修复动力学及 不同细胞自身修复能力存在差异。H2O、KCr2O,致DNA断裂作用 主要与过渡金属离子参与的OH产生有关,而AM的致DNA损伤作用 还有其它因素参与。