【非同位素原位杂交和免疫组化研究人类胰腺癌的Ki-67基因表达】.pdf

日 月 密级 文 究人类胰腺癌的Ki-67基因表达 1、细胞增殖相关核抗原Ki-67与细胞增殖调节 2、Ki-67抗原及编码基因的分子生物学特征 浙江医科大学附属第二医院 论文答辩日期 评阅人 年 论文:非同位素原位杂交和免疫组化研 吴育连 指导教师姓名(职务、职称、学位、单位名称及:研究生姓名:申请学位级别 论文提交日期 学位授予单位和日期 分类号 UDC
非同位素原位杂交和免疫组化研究 人类胰腺癌的K-67基因表达 浙江医科大学外科学(普外科)导师:彭淑 摘要 研究背景:1983年Gerdes在HodgkinandReed-Stemberg细胞中应 用单克隆抗体K-67发现了一新的核增殖相关抗原,而后,此抗原 被称为K-67抗原。进一步的细胞周期动力学研究提示:其最显著 的特征为细胞周期选择性表达,Ki-67基因在G期不表达,G期开 始表达,至M期达高峰,如细胞再进人G期,则表达完全停止。
定、石蜡包埋的胰腺组织中建立了地高幸标记的Ki-67mRNA原位 杂交,由exon13转录合成的Ki-67反义探针在胰腺癌巢细胞中测得 较强的胞浆及核周mRNA靶序列信号,而癌旁正常胰腺组织背景 清晰,几乎无Ki-67基因表达。胰腺癌连续切片分析Ki-67mRNA原位 杂交和Ki-67免疫组化结果证明:同一区域胰腺癌细胞胞浆内exon 13转录的同时存在高水平的Ki-67核抗原最终表达.Ki-67基因在 胰腺癌的表达与分化程度呈负相关。所建立原位杂交的特异性进 一步由同义探针、杂交前去RNA、无探针杂交和无抗地高幸抗体 讨论:过去已有许多研究证明K-67核抗原是细胞增殖的重 要调节蛋白,其表达 