【胡萝卜悬浮细胞和原生质体的玻璃化冻存及植株再生】.pdf

谨以此文献给我敬爱的导师黄纯农教授

摘要玻璃化法冻存是近年发展起来的一种简便有效的超低温保存的新方法.生物材料经高浓度玻璃化保护剂处理后,直接投人液氮冻存,使细胞和保护剂一起进人无定形的玻璃化状态。在玻璃态时,由于不会产生机械损伤或溶液效应,从而使组织和细胞在冻后保持本文报道了从胡萝卜根形成层诱导胚性愈伤组织并建立胚性悬浮细胞系的过程,同时采用玻璃化法成功地冻存了胡萝卜悬浮细胞和原生质体,存活率分别达83 和47 .冻后细胞能恢复生长并文中着重分析了预培养、保护剂处理的方法和时间、复温温度、洗涤条件等对冻存结果的影响,并用荧光显微等技术进行了研究和本文对基础研充的经典植物一胡萝下的玻璃化法超低温保存研究

草[88]、梨和苹果[58]、甜薯[80]、水稻[15,25,84]、大麦[16]、烟草[63] 茶[41]、日本冬葱[40]、百合[76],大蒜[28]等.冻存的材料有茎尖 [51,52,58,59,79,88,40,41]、愈伤组织[26,89]、珠心悬浮培养物[64,65,66]、原生质体[44,45]、体细胞胚[83]、多生芽簇[39]、顶端分生组织[87,40,76]、悬浮细虽然植物培养细胞超低温保存的第一例成功报道就是有关胡萝卜超低温保存的研究,但近年来很少有对胡萝卜这种经典材料的超低温保存方面的深人研究的报道,特别是用玻璃化法对胡萝卜培养细胞进行超低温保存的研究刚