【哺乳细胞参与MNNG诱导的遗传不稳定发生基因的分离和功能研究】.pdf

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哺乳细胞参与MNNG诱导的 遗传不稳定发生基因的分离和功能研究 Isolation and functional analysis of genes relevant with genesis of genetic instability induced by MNNG inmammalian cells 生理博士研究生:胡文蔚 Postgraduate forPh.D.In Physiology:Hu Wenwei 导师:余应年陈星若 Supervisors:YuYingnianChenXiangruo 浙江大学 Zhejiang University 1999.缩略语(Abbreviations) BES:N,N-bis(2-hydroxyethyl)-2-amino-ethanesulfonic acid-buffered saline DD-PCR:Differentialdisplayofpolymerasechainreaction dNTPs:Deoxyribonucleosidetriphosphates DMEM:DulbeccosmodifiedEaglesmedium EDTA:Disodiumethylenediaminetetra-acetate IPTG:Isopropylthio-β-D-galactoside MES差异显示作为一个近年来提出的寻找真核细胞基因表达改变的较为简 便的方法,被用于本实验。将细胞分三组处理:MNNG处理组用 0umol/LMNNG处理vero细胞2hr,MNNG合并蛋白合成抑制剂 放线菌酮(CHM)处理组则在MNNG处理后用含5umol/L的CHM 的DMEM培养基继续培养6hr,对照组则将MNNG的溶剂二甲亚矾 加入DMEM培养基处理2hr。通过对三组细胞的基因转录产物进行 扩增和显示,寻找有表达差异的片段。