【浙江医科大学博士学位论文人细胞色素P4502B6CDNA的克隆表达及应用研究】.pdf

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日 月 密级 19f6-x16-8 论文 教疫 专业名称病理生理 论文答辩日期 评阅人 年 论文:人细胞色素P45021B6cDNA 的克隆、表达及用研究 综述.CYP在体亢细胞中表达及师 又.CYP的转录诊导机理研充进展 吴健敢 指导教师姓名(职务、职称、学位、单位名称及:申请学位级别 论文提交日期 学位授予单位和日期 分类号 UDCchain transcription-polymerase 缩略语(Abbreviations) CIP,Calf intestinal alkaline phosphatase; EFC,7-Ethoxy-4-trifluoromethylcoumarin; EMEM,EarlesMinimumEssential Medium; HFC,7-Hydroxy-4-trifluoromethylcoumarin; KPB,0M Potassiumphosphatebuffer; NNK,4-Methylnitrosamino-1-(3-pyridyl)-1-butanone; Thea(Waxmanetal.,1991)。CYP2B7P、hIIB2、入MP1和入MP8与CYP2B6 的序列基本相似,只是发生了部分的缺失、插入和点突变,导致蛋白质合 本研究应用RT-PCR(Reversetranscription-polymerasechain reaction)技术从人肝组织中克隆CYP2B6cDNA片段,经酶切图谱和序列 分析鉴定后,构建真核细胞重组表达体,导入人羊膜FL、中国仓鼠CHL 和V79细胞中稳定表达,建立CHL-2B6转基因细胞系,尔后应用Northern Blot和DotBlot分别鉴定CYP2B6在mRNA水平的表达及独立存在于染色 体外的重组表达质粒的复