【浙江医科大学博士学位论文重组丙型肝炎病毒基因转染H9细胞模型的建立及其反义寡核甘酸体外抑制重组HCV的研究】.pdf

分类号密级 UDC 浙江医科大学研究生学位论文论文:重组丙型肌关病毒基因转染 H9细胞模型的建立及其反义寡核苷酸体外抑制重组 iHC V的研究综达:反义筹核苷酸抗病毒作用机理和抗脐关病毒的研究进展指导教师姓名(职务、职称、学位、单位名称及

重组丙型肝炎病毒基因转染H9细胞模型的建立及其反义寡核苷酸体外抑制重组HCV的研究博士生:刘勇导师:何南祥教授刘克测教授指导老师:陈智副教授中文摘要丙型肝炎病毒(HepatitisCVirus,HCV)的基因组全长约9kb,仅有一个长约9kb的大的连续开放读码框(ORF),其中结构区(SR)包括核心区(CR)和包膜区(ER),分别编码 HCV的核心蛋白和包膜蛋白,参与病毒颗粒的装配。目前尚缺乏理想的HCV感染细胞模型,对HCV感染的发病机理和治疗等研究带来很大的困难,且现有的抗HCV治疗的药物均不理想。

gpt载体进行共转染,利用gpt基因表达的黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(XGPRT) 能够恢复在XHTA-M选择性培养基中因霉酚酸和氨甲呤阻断的嘌呤生物合成途径,生长。转染pCD-HCV的H9细胞在选择性培养基培养至90天时,仍可通过RT-PCR 和DotELISA检测到pCD-HCVmRNA和表达的HCV抗原,表明本课题建立的pCD- HCV转染的H9细胞模型是成功的,为以后利用该细胞模型进行抗HCV的治疗等研究奠定了基础.本课题采用PCR技术,使得大量获取目的基因的过程更为简便快速,利用PwoDNA 聚合酶的校正活性,最大限度地避免了由于PCR过程中因核苷酸的错误而产生的不利影响