【大麦电击导入外源物质的研究】.pdf

要本文介绍了用电击法,对三种不同的大麦材料,电击导入外源物质(钙黄素、质粒PBI121),进行了较为系统的研究,用3-8ppm的烯效唑(s-3307)浸种,1/4MS培养5 天,可获得高质量的大麦叶肉原生质体。用HEPES电击缓冲液,间距为0cm的电击室,电击参数为:电压500V、脉冲宽度 300u8、脉冲个数3一6个,电击导入钙黄素,导入率达40 用上述电击缓冲液与电击室,电击参数为电压800V、脉冲宽度900u8、脉冲个数3个、对大麦悬浮细胞,电击导入钙黄素,导入率为16 以上,成活率接近70。

三、大麦叶肉原生质体导入钙黄素的电击条件六、大麦悬浮细胞及种胚诱导愈伤组织的Kna耐受性述:禾谷类植物转基因技术的研究一、改良的碱裂解法提取质粒DNA 二、原生质体生理状态与电击导入率四、大麦悬浮细胞的电击条件五、种胚电击导入PBI121 一、外源基因(供体)二、转基因的受体系统三、转化方法四、参考文献分析与讨论参考文献英文摘要图版致谢综

难,再生率太低。同时,PEG对原生质体有一定的毒性,转化率较低。但PEG法不受宿主限制,操作简便,成本低廉.在研究瞬间表达、基因调控及转基因植株等方面,仍被经常使用、2、电击法:是zimmermann等首先用于动、植物细胞导入外源物质Formn等人将该法应用于植物转基因8),该方法既可以植物原生质体为转基因受体,而却还可以带有完整细胞壁的材料如悬浮细胞、愈伤组织、植物组织、种胚等为转基因的受体,目前,用该方法获得的转基因植株有:烟草、蔓菁(81] 鸭茅[86)、玉米{48,68)、莴苣[21〕、蕃茄[18),水稻{8)等、电击法也不受宿主限制,用原生质体为受体,