[大麦与水稻培养细胞的玻璃化冷冻保存及其机理的研究]

【大麦与水稻培养细胞的玻璃化冷冻保存及其机理的研究】.pdf大麦、水稻培养细胞的玻璃化冷冻保存 及其机理的研究 目录 掏要 前言 材料和方法 胚性悬浮细胞系的建立 二 细胞的玻璃化超低温保存 三 恢复培养和植株再生 四 检测和分析方法 结果:一大麦胚性悬浮细胞系的建立(一)性愈伤的诱导(二)胚性悬浮细胞系的建立(三)细胞质量和生活力的检测 二大麦和水稻培养细胞玻璃化冻存的机理分析(一)预培养对于玻璃化冻存细胞的作用(二)过渡处理在玻璃化冻存中的作用(三)脱水环节中玻璃化保护剂的影响,(四)融冰过程中的去玻璃化现象(五)水稻悬浮细胞玻璃化冻存前后的电镜观察摘 要 源。本文报道了大麦花药直接进行液体振荡培养,快速建立胚性悬浮系,以及从大麦 幼胚和花药诱导胚性愈伤组织,从胚性愈伤组织建立胚性悬浮系的过程,并分析了 这两种建立悬浮细胞系不同途径的特点及其关键环节.玻璃化法冷冻保存是生物材料超低温保存领域近年发展起来的崭新技术。它采 用高浓度的玻璃化复合保护剂处理细胞,使细胞和保护剂一起进入一种不结冰、无 定形的玻璃化态。本文对大麦、水稻培养细胞的玻璃化冷冻保存及其机理进行了研 究,结果如下:1.预培养有助于提高存活率。比较了不同预培养方式的效果,其中经60g/蔗 糖浓度培养基预培养3天,再经0mol/L山梨醇预培养1天的细胞存活率最高。有关大麦培养细胞超低温保存的研究报道很少。Withers等[1]对大麦悬浮细胞 进行了冰冻保存,并初报了大麦幼胚的超低温保存。Takeuchi等超低温保存了大麦 愈伤组织来源的原生质体7]。Hahne和Lorz冷冻保存了大麦胚性愈伤组织.麦培养细胞超低温保存进行了一系列研究,对超低温保存大麦幼胚的几个因素进行 传统的超低温保存方法,如目前最常用的分步降温法,往往操作繁琐,需要昂贵 的程序降温仪等设备。最近发展的超低温保存的新方法一玻璃化法则可以克服这 些困难。)
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