【重组人β-肿瘤坏死因子rhTNF-β的纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡的研究】.pdf

目录.E.co1ip20KLT的培养.DEAE-SepharoseFF阴离子交换柱层析.Sephacry1S-200HR凝胶柱层析 2.rhTNF-B对肿瘤细胞的细胞毒效应 3.rhTNF-B诱导肿瘤细胞的凋亡.用流式细胞仪分析细胞周期.透射电镜观察细胞超微结构(二)rhTNF-B对肿瘤细胞的细胞毒效应(三)rhTNF-B诱导肿瘤细胞的凋亡.NS-1.U937细胞DNA琼脂糖电泳.透射电镜对NS-1细胞结构观察.rhTNF-B对NS-1.U937细胞周期的影响 1.rhTNF-β的纯化.菌体破碎.

重组人B肿瘤坏死因子(rhTNF-β)的纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡的研究摘要本文采用DEAE-SepharoseFF阴离子交换层析和Sephacry1 S-200HR凝胶过滤层析纯化大肠杆菌(E.co1ip20KLT)表达的重组人B肿瘤坏死因子(rhTNF-β)。初步纯化的rhTNF-B经蛋白电泳显示,在分子量18KD左右有明显条带:比活性达到 3x10°u/mg,回收率约为67。用[H-TdR掺入法,证实rhTNF-B 对HL-60,NS-1,YAK等肿瘤细胞的增殖有明显的抑制作用,显示了较强的细胞毒效应。

前言肿瘤坏死因子(TumorNecrosisFactorTNF)是一族重要的抗肿瘤细胞因子,主要包括TNF-a和TNF-β。TNF-a由巨噬细胞产生,TNF-B则由淋巴细胞产生。TNF-B旧称淋巴毒素(Lymphotoxin),它是1967年Rudd1eN.H等1在研究迟发性过敏现象时发现的。它与TNF-a的基因都位于人的第6号染色体上(小鼠则位于第17号染色体上)且紧密连锁,二者氨基酸序列有1/3相同,一半同源.作用于相同的细胞膜受体,产生相似的生物学作用。2-例如对多种瘤细胞的杀伤作用,参与免疫反应和炎症反应的调节,诱导多种分化细胞的抗原表达等。