【长叶车前花叶病毒RMV单克隆抗体的研制及初步应用】.pdf

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文中所用缩写和代号 BSA:牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin)1C5、1c8.已经液氮冻存的克隆化培养后的阳性杂交瘤细胞 1C5代表第一克隆化培养板的C5孔下同 ELISA:酶联免疫吸附测定(EnzymeLinkedImmuno一 sorbent Assay)F1:融合细胞 F2:经一次克隆化的杂交瘤细胞.F3:经二次克隆化的杂交瘤细胞.HGPRT:次黄嘌呤鸟呤磷酸核糖转移酶(Hypoxantineph.osphoribosyltransferase)HRP:辣根过氧化物酶(HorSeradishperoxiaase)。目录 页数 摘要 前言 材料和方法 1抗原病毒 2小鼠骨髓瘤细胞 3实验动物-《主要培养基和试剂一 5免疫程序一 6饲养细胞的准备-7细胞融合和选择培养 8抗体检测和筛选一 9阳性杂交瘤克隆化培养 10细胞冷冻和复苏 11杂交瘤细胞核型分析 12阳性杂交瘤稳定性检查 13小鼠腹水抗体的制备 14抗体类型鉴定一-15抗体阻断实验 16病毒中和试验 17单克隆抗体特异性分析长叶车前花叶病毒(RMV)单克隆抗体的研制及初步应用 、摘 要 应用细胞杂交技术融合用长叶车前花叶病毒杭州分离株(RMVha)和烟草花叶病毒普通株(TMVc)混合免疫的BaIbc 小鼠脾细胞和SP2/o一Ag14小鼠骨瘤细胞,经RMVhaTMVc 和TMV北京番茄株(TMVbe一t)混合筛选测定,成功建立了Rml Rm2Rm3、Rm4和Rm5共5株能稳定分泌特异性单克隆抗体(Mc一 Ab)的杂交瘤细胞株体外连续传代培养三个半月,液氮冻存2个 月复苏后分泌抗体稳定该杂交瘤细胞染色体数目稳定在97条。
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