美国白蛾核型多角体病毒半胱氨酸蛋白□的几丁质□基因分析及产物一步纯化杆状病毒表达载体

【美国白蛾核型多角体病毒半胱氨酸蛋白□的几丁质□基因分析及产物一步纯化杆状病毒表达载体的构建】.pdf单位代码:10339 研究生学号:D94913 美国白蛾核型多角体病毒半胱氨酸蛋白酶和几丁质酶 基因分析及产物一步纯化杆状病毒表达载体的构建 论文答辩日期 答辩委员会主席 姓名、职称、学位 论文评阅人 姓名职称、学位中文摘要 美国白蛾核型多角体病毒半胱氨酸蛋白酶和几丁质酶基 因分析及产物一步纯化杆状病毒表达载体的构建 以美国白蛾核型多角体病毒(Hyphantriacuneanuclearpolyhedrosisvirus,HcNPV) 为实验材料,根据EcoRI、HindIⅢl、PstI、SalI、XhoI酶切各片段分子量的大小测得 HcNPVA株基因组DNA的分子量为107kb。用含有半胱氨酸蛋白酶基因(Cysteine protease,CP)的家蚕核型多角体病毒(Bombyxmorinuclearpolyhedrosisvirus,BmNPV) 基因组PstI2.PTTH.感染SPIM细胞表明:CP、ChiA两基因为病毒复制非必需基因,它们的失活不 影响多角体的形成。ELISA分析表明:CP、ChiA两基因失活后,可提高PTTH的表达 水平.推测杆状病毒的半胱氨酸蛋白酶与以往的病毒半胱氨酸蛋白酶不同,可参与宿主 组织液化和降解,为病毒蛋白的合成提供氨基酸原料,在病毒的水平传播中起重要作用,在细胞程序性死亡方面也许扮演某种角色.杆状病毒的几丁质酶与降解昆虫几丁质外 表皮,促使病毒释放出体外,引起另一轮感染有关 表达产物的纯化是一件费时、费工、费钱之事,将pGEX-3X中的Schistosoma 构建了融合表达杆状病毒转移载体Bacsj26.
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