【美国白蛾核型多角体病毒半胱氨酸蛋白□的几丁质□基因分析及产物一步纯化杆状病毒表达载体的构建】.pdf

单位代码:10339 研究生学号:D94913 美国白蛾核型多角体病毒半胱氨酸蛋白酶和几丁质酶基因分析及产物一步纯化杆状病毒表达载体的构建论文答辩日期答辩委员会主席姓名、职称、学位论文评阅人姓名职称、学位

中文摘要美国白蛾核型多角体病毒半胱氨酸蛋白酶和几丁质酶基因分析及产物一步纯化杆状病毒表达载体的构建以美国白蛾核型多角体病毒(Hyphantriacuneanuclearpolyhedrosisvirus,HcNPV) 为实验材料,根据EcoRI、HindIⅢl、PstI、SalI、XhoI酶切各片段分子量的大小测得 HcNPVA株基因组DNA的分子量为107kb。用含有半胱氨酸蛋白酶基因(Cysteine protease,CP)的家蚕核型多角体病毒(Bombyxmorinuclearpolyhedrosisvirus,BmNPV) 基因组PstI2.

PTTH.感染SPIM细胞表明:CP、ChiA两基因为病毒复制非必需基因,它们的失活不影响多角体的形成。ELISA分析表明:CP、ChiA两基因失活后,可提高PTTH的表达水平.推测杆状病毒的半胱氨酸蛋白酶与以往的病毒半胱氨酸蛋白酶不同,可参与宿主组织液化和降解,为病毒蛋白的合成提供氨基酸原料,在病毒的水平传播中起重要作用,在细胞程序性死亡方面也许扮演某种角色.杆状病毒的几丁质酶与降解昆虫几丁质外表皮,促使病毒释放出体外,引起另一轮感染有关表达产物的纯化是一件费时、费工、费钱之事,将pGEX-3X中的Schistosoma 构建了融合表达杆状病毒转移载体Bacsj26.