【长期冻存人外周血淋巴细胞的功能研究】.pdf

摘要本文对淋巴细胞的长时期低温保存的技术进行了实验探索。从用肝素或ACD抗凝的人外周血白膜层中分离出淋巴细胞,在含方了同的低温保护剂和血法配方的 RPM11640培养液中降温后在液氮中进行长期冻存。在冻前及连后10 20和365天时分别检测淋巴细胞的免活性.生理生化功能死超微结构,从中常选出较佳的长斯陈存人外用血淋巴细胞的技术方法.其中以含1 DMS0知40 人AB血法的RPM1 1(40 液作为冻存液时,效果最好。检查的结早证以; 用上述方法在液氨内阵存年的淋巴细胞收率在925 以上,存活率大于95。冻后涉巴细胞的E花3.

长期冻存人外周血淋巴细能的功陆研究自从 Ashurod-Smithsa Ronve anol Cohen(96t) 低温保存于离和人满巴细能获待城功以来,许多学者进一步作了群宽,期登能在不改变免疲学活性知生理功能的首投下,改进涟存淋巴细能的方法,以控高冻存的放果和远长诗存时问.已有了少报写,证实短期冻存的抄巴细能能用于花孙试验(15和细能分导的免没反应,巴细胞反应张细能毒试验8]等,涟存的抄巴细脆也法用于HLA组给分型试验<州)诗多细能免放试验,由于缺乏统一的标溅拂已细陀,以致重复性较差,而陈存的淋巴细脆就可以用的外周血游巴细胞用于临房

一。材料方法 1.淋巴细胞的分离:37名0 型助血员孙因血,年令 25.34 岁,男 19人、女18人,用肝素(100单位/升,上海生物化学划落T出品)或AcD(NIH-A)抗凝,2500 2800Pm离心15分钟,终到红细佗和血聚交昂处的富含白细能的白膜层。白喉层由杭州市中心血提供.白膜层用内含mM Heres 、100/毫汁古蛋素,/毫升链雷素的(RPMI1640境养液(GLBCo出端) 等量稀释后,1:1(V)登加于三制巴细佗分离三液土海试剂二厂出品此垂1.