【棒狀菌中質粒DNA的轉化和載體的構建】杭州大學.pdf

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浙江大学研究生学位论文用纸 1 目录 一,摘要 二,前言 2-/0 三,工作设想 1/-14 四,材料与方法/5-22 五,结果 23-38<一>旗粒px±10145对谷氢酸棒杯菌1014-6的转化 23-27 1.青要素和落菌酶对克生质体的形成、再生和转化率的影响 23-24 2.PEG分子量和浓度对转化率的影响 24-25 3.转化畴间对转化率的影响 4.转化温复对转化率的影响 25-26 5.质粒 DNA用量与转化子数和转化率的关系 26-27 6.表达时间与转化子数的关系 7.浙江大学研究生学位论文用纸 P 一,摘要 本文通过真粒 pxz10145 对谷氨棒杆菌 1014-6(Corynebacterium glutamicum 1014-6)层生预体转化条件 的研究,在棒状菌(Corynefarm bacteria)中建立了转化 系统。在最适转化条件下,转化率达列 103—1/ug:DNA.运用所建立的转化条件,成功地将质粒pxZ10145转入 纯齿棒杯菌 B9(Corynebacterium crentum B9)和 产氨短杆 新宿主中保持基本稳定。浙江大学研究生学位论文用纸1 氨基酸是组成蛋自的基本成份,它广泛地应 用于食品、医药,饲料等方面,与人类生活密切相关.八十年代初,随着重组 DMA技术的发展和应用花 国的扩大,基因工程很自丝地渗入到氨基酸这 一领域,它包括对氨基酸高产菌株的选育和对氨 基酸合成途经代谢调控的研究。棒状菌有许多 是多种氨基酸和样苷酸的生产菌株,有很高的 经济价值。它是开展氨基酸基因工程研究的主要 对象.在棒状菌中开展基因工程的研究,首要的问题 是建立合适的栽珠转化系统.对棒状菌的载阵,前人进行了大量的研究,包 括对载碎的锦选和构建。至今在棒状菌中节选 到的载体有小型慎粒、传递性质粒和噬菌体,见 表1。
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