【血吸虫病特异性免疫RNA的研究】.pdf

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血吸虫病特异性免疫RNA的研究 I、提取与体外传递免疫的初步观察 浙医大传染病研究生蔡卫民 指导者王季午马亦林 近年来血吸虫病的免疫研究有很大进展,国内外均有报道晚期血吸虫病的细胞免疫功能。免疫RNA能提高机传的免疫功能,而无转移 因子的种间限制,已用于肿瘤与乙型肝矣的治 疗。李文节一部分报道丛血吸虫病巨脾患者的 脾脏中,提取血吸虫病特异性免疫RNA(S-RNA).用白细胞粘附抑制(LAI)试验,测定其 活性,并观察其对正常人和晚期血吸虫病患音 的白细胞传递免疫现象。弃上清渣,得沉淀物 溶于冷生锂鹽水中(海克脾/),加醋酸钾、冷无水 个 充分摇与 乙醇(量同上) 置-20℃冰箱过夜 重复上述步骤,先涤了次 离心弃上清渣,沉淀物(RNA) 溶于冷生理盘水中,紫外老分光光度计定 性定量,3装成2m/2m皮,一20°℃保存备用 以上操作在4进行。用晚期血吸虫病患 者脾脏按上述方法制得的免疫RNA称血吸虫病 特异性免疫RNA,而用非血吸虫病患者(环卵 与酶联免疫吸附试验阴性)脾脏制得的免疫RNA 称非血吸虫病RNA(N一RNA)。(二) LAI试验:采用葛氏4及祝氏所分绍 的方法,且结合我们实验室的冥体情况对方法 进行改进。述分离获得的白细胞悬o5m中加S-RNA 1 mg,再加“199”培养渣或Hamks渔至2.3m,37°℃ 水浴30分钟后,用Hamks洗涤去除游离的S-RNA,将细胞稀释至所需浓度备用。用作对照的白 细胞则用N-RNA处理(同S-RNA方法)或不处理 5.温育与细胞计数:将上述经S-RNA、N-RNA或未经处理的白细胞悬渔0m(2.3滴) 分别加或不加WA,加WA称试验组(T),不加 WA称对照组(C)。所用WA的量为(0灿g(预鱼试 验中加200M未见假阳性),混匀后,作孵育前 白细胞计数,其后移至力瓶中,加盖,将力瓶 水平温育在了千℃培筹箱中2十時后,吸取十瓶 培养物作细胞