【福建医学院硕士学位论文小肠结肠炎耶氏菌VW抗原质粒DNA的简易提纯和限制性□切分析】福建医学院.pdf

小肠结肠炎耶氏菌V/W抗原质粒DNA的简易提纯和限制性酶切分析研究生:罗迅导师:包幼迪工.前言 Ⅱ.材料与方法一菌标二、培养基三、抗血清四、主要试剂五入DNA及限制性内切酶六、Y、E、质粒标的鉴定七,质粒DNA提取方法八。质粒DNA纯化方法九质粒DNA浓度和纯度测定十,限制性内切酶的酶切缓冲系统十一、酶切片段分子量测定十二、DNA凝胶电泳分析 Ⅲ,实验结果一、Y、E、质粒株鉴定结果

小肠结肠炎耶氏菌V/W抗原质粒DNA的简易提纯和限制性酶切分析旱興小肠结肠炎耶氏菌(以下简称Y、E,)于1939年由Schlei=st 和Coleman首先在美国发现。它能引起消化系统、呼吸系统、心血管系统、骨骼结缔组织以及局部和全身疾患,从 ZinxX3)发现YE.携带一种42±11×106道尔顿的V/w抗原质粒以来,该质粒.在Y、卫,致病中所起的重要作用已引起日益广泛的重视.V/w抗原质粒能编码V/w抗原和其它多肽,使Y、E.具有抗吞噬细胞吞噬的能力,并能在网状内皮系统在活,增殖.组织侵袭性,能侵入上皮细胞,并使HEp-2剥脱.

葡萄糖2ml1M血氯化钙0ml,加水至1000ml)三、抗血清:鉴定Y、E、血清型的抗血清和鉴定V/W抗原质粒的抗血清由福建省卫生防疫站陈贻楷同志赠给四、主要试剂:用十二烷基硫酸钠(Serra产品,以下简称SDS)N一三經甲基一Z-氨基甲烷(ZMerck产品,以下简称Tris配测3 SDSmMTris(pH12)的裂解液4,苯酚经重蒸后与氯方按1:1体积混合,氯仿与异戊醇按24:1体积混合已醇经水饱和置 4C存效.E、缓冲液:40mMTriS、2mMEDTApH7 TBE.