【福建医学院硕士学位论文小肠结肠炎耶氏菌毒力质粒的分子克隆及物理图谱的绘制】福建医学院.pdf

pYB为 0:3 型小肠结肠炎 耶氏菌的毒 力质粒.以 没克鉴到E.Co11C600,货存了78张重组子的充隆库 从中筛选的一体重组子在RPMI1640培养液37C培恭时 能够产生自凝,其37℃培养物与耶氏菌温度诱导的外膜蛋白 的特导免疫血清起凝集反应,硫酸铵盐凝实验表明,37℃培 养的直组子的表面疏水性比23℃的培养物明显增高。腹制性 内切海分析表明,该重组质粒是由pYE029的BanH1一2 片段与BR322构建而底,提示该片校带有外膜蛋白的结构 和调控基因。利月限制性内切酶对pYE029的单切.双切及 罚分霉切。绘制了包括Sa1I.
小肠结肠炎耶氏菌毒力质粒的分子 克隆及物理图谱的绘制 研究生:张上定 导师:包幼迪 工.摘要 Ⅱ.前言 Ⅲ。材料与方法 一菌株 二培养蕃 三.抗血清 四。主娶生化试剂.五质粒阳性株的鉴定 六。工具酶及标准DNA 七,质粒DA的提取纯化 八,限制性核酸内切嗨的反应系统 九DNA的体外连接.
塑毒力质粒的物理图谱均未见报道,开展这方面工作,无疑对 近一步的基因操作和从分子水平上阐明毒力质粒的致病机制具 鉴于上述情况,本文采用分子克隆等技术对0:3型毒力质粒(pYE029)的分子结构及基因表型进行了研究 首元,以pBR322作为外源DNA的载体,将毒力质粒 pYE929的Bam HI 片段克隆到E,Co1i C600,得到 78株直组子的克隆库,从中筛选出一株具有表达温度诱导的 外膜蛋白和37℃白凝性的重组于.命名为c600(pREB2)限词性内切离分析表明,该重组子带有pYE229的Ban一2 片段,初步证明该片段上具有外膜蛋白的结构基因及调控基因,其次. 