【细胞周期依赖性NAD含量变化及其与DNA半保留复制的关系】.pdf

1.细胞周期依赖性NAD含量变化及其与DNA半保留复制的关系 THE RELATIONSHIP BETWEEN THE CELICYCLE DEPENDENT CHANGE OF THE CELLULAR NAD CONTENT AND DNA SEMICONSERVATIVEREPLICATION 2,ADPRT介导的细胞NAD含量下降可以作为检测化学物质致 DNA损份的判断终点 CAN BE USEDAS AN ENDPOINT DETECTING DNA DAMAGE INDUCED BY CHEMICALS 浙江医科大学病理生理教研室研究生,方明 Postgraduatestudent

细胞周期依赖性NAD含量变化及其与DNA 半保留复制的关系浙江医科大学医学系病理生理学教研室 85级研究生:方明导师:余应年陈星若摘要(工)真核细胞内,一种新发现的与染色质紧密相连的核内酶一多聚腺苷二磷酸核糖基转移酶(ADPRT)催化其唯一的底物NAD在尼克酰胺与腺苷二磷酸核基之间的N一糖苷键断裂,使后者聚合成多聚腺苷二磷酸核糖(ADPR)］,然后将(ADPR)n与多种蛋白质如组蛋白,非组蛋白及核内酶包括ADPRT本身共价结合。

DA片段是否能成为激活ADPRT的因素所有实验均在人羊膜F工细胞系上进行。用°H一TdR脉冲标记测定DNA合成速率并作细胞周期追踪,细胞DNA含量用乙醇脱氢酶循环法测定,细胞蛋白质含量用Lowry氏法测定.结果显示如下:用精氨酸饥俄法使细胞周期进展阻滞在G期,换以完全培养基后使细胞同步进入细胞周期生长。在阻断释放的当时及以后预定的时间点分别测定°H一TdR的掺入率,细胞RDA含量及蛋白质含量。我们观察到,随着细胞周期进展,3H－TdR掺入率逐步增加在阻断释放后18一24小时达到高峰,细胞KAD含量在阻断释放.