【抗人精子单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定和精子表面萤光定位研究】.pdf

目一、中文要二、英文摘要三、论文 1.前言 2、料和方法 3.结果 4讨论四综述 1。综述(一) 2,综述二

抗人精子单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定和精子衰面受光定位研究浙江医科大学生物化学专业研究生陈筱利导师朱寿民刘子贻中文摘要抗精子免疫避孕是近十几年来兴起的一个新的研究领域,单克隆抗体技术为识别和提纯精子膜有效抗原投供了一种新的有力手段,为了发展抗精子免疫避孕疫首及更深入地研究人类精子抗原的结构和功能,阔明精子发生和受精过程在分子水平的改变,我们制备了一组抗人精子单克隆抗体,并对其生物学特性作了初步的鉴定,取正常人精液,37℃,30分钟液化后,1000转/分离心 5分钟,云精浆,沉淀清子用Hanks液洗涤三次,将10 个子腹腔注射免疫Balb/C小鼠,每隔一周重复免淀

均能与沉淀在丙酮中的精子膜成分起免疫结合反应,而不与溶在丙酮宁的精子膜成分起反应,若将沉淀在丙酮中的精子膜成分加热 100℃分钟.抗休不再与之发生结合反应。推测 4种抗体所识别的抗原很可能是精子膜上的蛋白质成分而非糖脂成分,根据HS一3和HS一4分泌的单克隆抗体既能与精子窄面结合同时又能与人精浆成分起免疫交叉反应,故认为它们所识别的抗原可能是一种既存在于精浆又结合于精子表面的精子膜外套抗原,为观察4种单克险抗信结合于精子的部位,用问接免疫荧光来进行精子表面的荧光定位。