【浙江医科大学博士学位论文用穿梭质粒证实Vero细胞中非定标性突变的存在及其序列特异性分析】.pdf
用穿梭质粒证实e:0细胞中非定标 性突变的存在及其序列特异性分析 Evidenceforthe PresenceofNontargeted Mutagenesisin.Vero Ceils and an AnalysisofIts Sequence Sperificity Lsing a Shuttle Vector Plasmid 浙江医科大学病理生理教研室 Department ot Pathophysiology Zhejiang Medicai University 博士研究生:张小山 Postgraduate for Ph.D.
用穿梭质粒证实er0细胞中非定标性突变的存在 及其序列特异性分析 浙江医科大学腐理生理教研室 博士研究生:张小山 导师:余应年陈垦若 摘要 细菌暴露于一些化合物使细菌的DNA损伤或者干扰其 复制等均可引起SOS工作网中的一系列筹因表达,其结 是引i起多种生理性反应,这些反应受recA和lexA基因产 物的调控,称之为SOS反应。易误性的DNA复制也是-种SOS反应,它可以在未遭受损伤的DNA位点引I入突变.哺乳类细照中也可能存在着类似于细菌的SOS反应,由类似于细菌中的Weigle再活和Weigle增强突变形成作用而获得支。
切除仍以甲基化形式存在的未经细胞中复制的质粒。然后用 CaC1法将从细胞中提纯的质粒转化受体菌MBM70 70(FIacZ(Am)CA7070,LacY1hsdRhsdM(araABC-leu)7679galHgalKrpscthi),将转化 子细菌置于含氨苄青舞素、5一溴一4一氯-3一吲哚基一 β-D-半乳糖(5-bromo-4-chloxo一3一 indoyl一β-D-galactoside,X-gal)以及异丙基 -β-D-碗代半乳糖苷(isopropyl-β一D-thioga!- actoside,IPTG)的LB平板中。