【大鼠雄性生殖细胞共培养方法及其在氯化镉和醋酸铅生殖毒性检测中的应用】.pdf

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大鼠雄性生殖细胞共培养方法及其 在氯化镉和醋酸铅生殖毒性检测中的应用 浙江医科大学卫生毒理教研室 研究生袁雄 导师黄幸纾 摘要 近50年来,人类精液中平均精子密度下降41,每次射精的精 液量下降19。随着经济的发展,人类接触具有雄性生殖毒性的 化合物越来越多,为了及时检测此类化合物,必须建立一个敏感的 实验模型。用支持细胞和生殖细胞共培养方法筛试外来化合物在国 外已进行了多年研究,该方法保留了支持细胞和生殖细胞的完整性,具有灵敏度高、简单、终点判断容易,经济等优点,但国内还未见 有相关的报道,本研究旨在对这一方法作一探案,为进一步研究打 下基础。本实验结果和某些文献报道,可以认为支持细胞和生殖细胞共培养 法最佳培养条件为31℃,5 C0a,957air,pH6:9±0。培养液成分 变化也能影响培养结果。本试验曾用了两种培养液,一种加氨基酸,一种不加氨基酸,结果发现不加氨基酸的培养液,细胞不能生长.另外,动物的种属、年龄等也是不可忽视的影响因素.氯化镉和醋酸铅可以引起生殖细胞脱落数的增另。并且随着剂 量的增高,时间的延续,脱落细胞数也呈上升趋势。体内研究已经 确认,镉和铅可以透过血睾屏障损伤睾丸,引起生精细胞脱落。本 实验体现了良好的体内外一致性。cells and germ cellswere prepared from the testsof 28- day-old SD male rats.Tissueseparated fromthe tunia albuginea was minced with fine soissors into fragment not larger than 1 mmin size,andinoubatedformorethan ten minutes at32C 0.