【中国仓鼠卵细胞二氢叶酸还原□基因的PCR扩增与表达金黄色葡萄球菌核酸□及其突变体的分离纯化和结构与功能的研究】.pdf

浙江大学硕士论文第一部分中国仓鼠卵细胞二氢叶酸还原酶基因的 PCR扩增与表达

浙江大学硕士论文摘要酸还原酶基因扩增后,插入到质粒pBV221中,构建成胞内表达载体pDHFR-1,经DNA序列测定,结果表明其序列正确无误,并成功地在大肠杆菌(E.co/iDH5a)中得到表达,使用LKB激光光密度计扫描后可知其表达量占细胞总蛋白量的12 6。从而为深入研究蛋白结构和功能关系以及新生肽链折叠提供丰富的实验材料。

浙江大学硕士论文中国仓鼠卵细胞二氢叶酸还原酶基因的PCR扩增与表达二氢叶酸还原酶DihydrofolateReductase,EC1.简称DHFR广泛存在于各类生物有机体中,且在生物体代谢中起着重要的生化功能,即在有辅酶NADPH存在的情况下,能够催化7,8-二氢叶酸还原成5,6,7-四氢叶酸,而四氢叶酸作为生物体内一碳单位的载体参与多种生物合成。作为一个分子量较小,结构较为简单的酶蛋白分子,在研究酶蛋白结构和功能关系中受到广泛的重视:但该酶在生物体内含量较少,例如鸡肝DHFR在鸡肝中的含量只有约5mg/kg,因此采用基因工程手段大量获取DHFR就显得十分必要。