【棒状菌中质粒DNA的转化和载体的构建】.pdf

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浙江大学研究生学位论文用纸 P 目录 一.摘要 二,前言 2-/0 三,工作设想 11-/4 四,材料与方法/5-22 五,结果 23-38<一>质粒 px±10145 对谷氢酸棒杆菌1014-6的转化 23-27 1.青要素和济菌酶对原生质体的形成、再生和转化率的影响23-24 2.PEG分子量和浓度时转化率的影响 24-25 3.转化畴间对转化率的影响 4.转化温后对转化率的影响 25-26 5.质粒 DMA用量与转化子数和转化率的关系 26-27 6.表达時间与转化子数的关系 7.浙江大学研究生学位论文用纸 P./一,摘要 本文通过粒px210145对谷氨棒杆菌1014-6(Corynebacteriumelutamicum1014-6)后生预体转化条件 的研究,在棒状菌(Coryneforn‘acteria)中建立了转化 系统。在最适转化条件下,转化率达到103-1n/uDNA.运用所达立的转化条件,成功地将质粒nx219145 转入 纯些棒杯菌B9(Corynebacteriuncrentum3o)和产氨短杆 新宿主中保持基本稳定。浙江大学研究生学位论文用纸十 氨基酸是组成蛋白真的基本成份,它广泛地应 用于食品、医药、饲料等方面,与人类生活密切相关.八十年代初,随着重组DMA技术的发展和应用花 国的扩大,基因工程很自然地渗入到氨基酸这 一领域,它包括对氨基酸高产菌株的选育和对氨 基酸合成途经代谢调控的研究。棒状菌有许多 是多种氨基酸和梭苷酸的生多菌株,有很高的 经济价值。它是开展氨基酸基因工程研究的主要 对象.在棒状菌中开展基因工程的研究,首要的问题 是建立合适的载转化系统.对棒状菌的载阵,前人进行了大量的研究,包 括对载阵的锦选和构建。至今在棒状首中饰选 到的载体有小型质粒、传递性慎粒和噬菌体,见 表1。
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