【反义centrin对HeLa细胞周期及中心体结构和功能的影响陈晓波】.pdf

北京师范大学博士学位论文论文题目:反义Centrin对HeLa细胞周期及中心体结构和功能的影响系别、年级:生物系96级博士研究生学科、专业:细胞增殖与调控生物学完成日期:1997年11月.1999年4月陈晓波导师:王永潮

中文摘要为了探讨人centrin基因在中心体组织结构以及双极纺锤体形成过程中的作用,我们利用PCR技术从HeLa细胞中获得占全长80 的HsCenl(HomoSapiensCentrin1gene),并构建到以绿色荧光蛋白(EnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP)为报告基因、四环素调节表达的真核表达载体,获得反义真核表达重组质粒pBI-EGFP-AC.采用磷酸钙法转染HeLaTet-off细胞,通过一系列的克隆和亚克隆获得了稳定表达反义HsCen1的细胞株HAC.

综述在真核细胞中,中心体作为主要微管组织中心(microtubuleorganizingcenter,MTOC),决定着细胞内微管的极性、数目和分布,在间期,它组织胞质微管,构成细胞骨架的主要纤维系统,一方面作为细胞内物质运输的轨道基础,另一方面对细胞形状的维持和改变也起到必不可少的作用.在M期,经过复制的中心体形成纺锤体的两极,指导着有丝分裂事件的进行,这种双极纺锤体的形成是染色体平均分配的前提,异常的中心体增殖造成染色体不均等分配,因此,保证中心体在每一个细胞周期中复制且仅复制一次,对细胞的增殖来说至关重要,中心体周期象动粒周期一样是一个非常复杂的动态过程,它包括新中心体的