【固定化多核甘酸磷酸化□的制备特性及其应用研究】邱树毅.pdf

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目录 摘 前 言 材料与方法 一。材 二。使用仪器.三方 1。PNP酶活力测定方法 2。聚合转化率测定方法 .3。丙烯酰胺单体测定方法,4.产品紫外吸收测定方法 5。产品分子量测定方法 6。固定化酶方法 结果与讨论 一。固定化PNP酶的制备 1固定化方法与载体的选择.吸附法。载体结合法.2。用固定化酶柱反应器连续化聚合生产多核苷酸的研究3 2 3。产物的性质。紫外吸收光谱。分子量测定(3。精要 在比较了各种固定化方法和载体的基础上,选 用58 的聚丙烯酰胺凝胶可制得性能良好的固定 化酶。与游离酶相比,固定化PNP医的动力学特性 有所改变:表观米氏常数Km=9X30M比游离酶 增大。最适温度范围扩宽,稳定性提高.固定化PNP酶,在0g(湿重)/m137CPH90 MnBOn盘Gu4mMEDTA1mMCDP30mM的条件下,由CDE 聚合生成po1yo的转化率达50 以上。产品的紫外 吸收特性符合标准,分子量接近工厂合格产品.固定化PNP酶经反复使用12批,酶活力还保 持83。3 在4℃保存一个月,仍保持最初酶活力 80.
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