【植酸□基因在工程菌中的表达及初步改造的研究】毕士峰.pdf

【植酸□基因在工程菌中的表达及初步改造的研究】毕士峰.pdf

分类号 学校代码:10561 UDC 密级 学 号:199839034201034 华南理工大学学位论文 植酸酶基因在工程菌中的表达及初步改造的 研究(广东省自然科学基金资助项目)毕士峰 指导教师:张毅副教授 食品与生物工程学院生物工程系 申请学位级别:硕士 专业名称:-生物化工 论文提交日期:2001 论文答辩日期:2001.华南理工大学工学硕士论文 2聚合酶链反应(PCR)2DNA片段的连接 2感受态细胞的制备 2质粒的转化 2重组质粒稳定性的测定 2细胞的裂解 2SDS-PAGE电泳 2植酸酶酶活测定方法 第三章结果与讨论 3pTrcHis2B质粒的转化 3PCR扩增植酸酶基因 3pMD4质粒的酶切 3聚合酶链反应(PCR)扩增植酸酶基因phyA,3pTrcHis2B-phyA质粒的构建 3SDS-PAGE分析植酸酶蛋白质 3重组子中质粒的稳定性 3重组子植酸酶的酶学特性 3.摘要 摘要 植酸酶能提高植酸磷的利用率,除去抗营养因子和减少污染,由于 植酸盐存在于谷物类和植物性的粕类中,在家禽及其它单胃动物日粮中 成功地利用植酸酶的价值超过任何其它的单一或复合酶的综合效益,使 得植酸酶成为全球最有潜力的饲料酶制剂.本论文研究了植酸酶基因在工程菌中的表达及初步改造.以含有植酸酶基因的PMD质粒为模板,利用PCR方法扩增出植酸 酶基因片段,把表达载体pTrcHis2B和PCR产物进行重组,构建成功 pTrcHis2B-phyA质粒,转入大肠杆菌JM109中进行发酵培养。