【分子生物学实验技术】郝福英.pdf
分子生物学实验技术 李云兰周先碗李茹 北京
前言 近年来分子生物学在医药卫生、遗传工程、动物、植物基因工程及其他领域有着突飞猛进 的发展。分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可 缺少的一部分.为培养学生分析问题和解决问题的能力,提高学生在分子生物学技术方面的动手能力,特 编写这本实验技术教材,它适合于生物、医药院校的本科生、研究生选用.本实验技术教材的特点之一是主要讲述常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包 括质粒DNA的制备.DNA的重组.基因的转化及表达.核酸的序列分析以及生物大分子印迹 技术等等。特点之二是增加了新内容。
实验1质粒DNA的提取、酶切与鉴定 大肠杆菌在LB培养基上培养,用碱性SDS快速方法从大肠杆菌细胞中分离、提取质粒 DNA,再经限制性内切酶酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳分离,溴乙锭染色,在紫外灯下检测。通 过本实验可学习和掌握质粒的提取纯化、限制性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳等方法和技术.1质粒DNA的提取 原理 要把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进细胞中去进行繁殖和表达,需要运载工 具,携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体(vector)。载体的设计和应用是DNA体 外重组的重要条件。