【临床基因扩增检验技术】申子瑜等人民卫生.pdf

全国临床基因扩增检验实验室技术人员上岗培训教材临床基因扩增检验技术部临床检验中心)申子瑜(卫生部临床检验中心)李金明(卫生部临床检验中心)刘敬忠(首都医科大学朝阳医院)张正(北京大学人民医院)郑怀竞(卫生部临床检验中心)尚红(中国医科大学附属第一医院)陶其敏(北京大学人民医院)贾弘提(北京大学医学部)黄道培(上海浩源生物科技有限公司)

前言自Mullis1983年发明聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)这种核酸扩增技术以来,作为一个工具,它已深人到生命科学研究的每一个角落.作为一个“概念”,它给从事基因研究的人们以丰富的想像力,派生出了各种各样的有其独特使用目的的核酸扩增检测技术.到了20世纪90年代中期,国内的临床实验室,将PCR技术广泛地用于感染性病原体如HBV、HCV、结核杆菌、性病病原体等的临床检测,但由于缺乏对核酸扩增检验技术完整深人的了解,以及缺乏相应的质量保证措施,导致部分实验室检验结果有很大的主观性和随意性,假阳性和假阴性较为常见。

二、引物三、缓冲液四、Mg2+36 五、三磷酸脱氧核苷酸(dNTP)六、耐热DNA聚合酶七、温度和循环参数第三节PCR扩增产物的分析法一、凝胶电泳分析法二、点杂交三、微孔板夹心杂交法四、PCR-ELISA法.五、荧光操针标记法第四节PCR反应相关检测技术一、原位PCR技术二、标记PCR和彩色PCR 三、反向PCR 四、不对称PCR 五、多重PCR 第五节其它基因扩增检验技术一、连接酶链反应二、依赖核酸序列的扩增三、转录依赖的扩增系统四、Q3复制酶反应五、bDNA 第三章聚合酶链反应测定的技术要点第一节PCR技术、PCR实验包括的步骤二、影响